立博泰业-荧光型WLRN8209KIT试剂盒价格

恒温扩增试剂盒原理

本试剂盒采用恒温荧光检测技术，通过Bst聚合酶及特异性引物在等温条件下对样本中的目的片段进行特异性扩增，荧光型WLRN8209KIT试剂盒代理商，结合核酸染料或检测仪器使用，通过反应液颜色的变化或者相关仪器判断结果。

   检测样品类型 人源性、动植物源性的病原体及其他细菌、真菌、病毒等的核酸。

   反应条件 反应温度：63℃；

   反应时间：20~60min；

   反应仪器：恒温金属浴/ESETubeScanner/荧光PCR仪/GenieII/浊度仪。

   检测方法 染料法、浊度法、荧光法

恒温快速扩增试剂盒应在怎样的温度下使用？

标准的ERA扩增试剂盒经过配制可在37℃-42℃的温度范围内操作。过高的温度会对反应体系产生不利的影响，因为酶会逐渐地失去全部活性。对于RT试剂盒，我们建议客户在40℃下运行反应，因为逆转录酶在稍高温度下具有更高的活性。

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恒温快速扩增试剂盒常用酶原料有哪些？

逆转录酶逆转录酶又称反转录酶，是一种RNA介导的DNA聚合酶，其反应过程中体现出三种功能为：以RNA作为模板合成互补DNA链 (complementary DNA，荧光型WLRN8209KIT试剂盒报价， cDNA)，形成RNA:cDNA杂交链；发挥RNase H活性，降解RNA:DNA杂交链中的RNA模板；以cDNA作为模板合成*二链DNA，形成双链DNA（如下图）。其中，RNaseH活性是逆转录酶的一个内在特性，可在合成过程中同时切割RNA:cDNA杂合链中的RNA模板，该特性可能降低逆转录效率，因此在实际应用中，常采用人工改造后的低或无RNase H活性的逆转录酶。常用的逆转录酶有AMV和M-MLV，AMV分离自禽类成髓细胞瘤病毒(Avian Myeloblastosis Virus， AMV)，M-MLV逆转录酶分离自莫洛尼氏鼠病毒(Moloney Murine Leukemia Virus，荧光型WLRN8209KIT试剂盒价格， MMLV)，前者热稳定性优于后者，但AMV逆转录酶的RNaseH活性也更强，不利于长片段cDNA合成。市面上多使用经基因工程改造过的M-MLV逆转录酶，其热稳定性改进，可在50℃左右工作，同时RNase H活性进一步减弱，提高了其逆转录效率。